Абсолютно специфичные ферменты ускоряют определенный тип реакции одного единственного субстрата. Так, аргиназа катализирует только реакцию гидролиза аргинина на орнитин и мочевину; сахараза - гидролиз сахарозы на глюкозу и фруктозу.
Особым видом абсолютной специфичности является стереоспецифичность, т.е. способность ускорять превращения только одного стереоизомера вещества.